请回答黄花蒿植物组织培养的有关问题：

请回答黄花蒿植物组织培养的有关问题：

(1)黄花蒿的植物组织培养研究在我国己有数年历史。选取黄花蒿的茎段后，通常用体积分数为70%的酒精等药品对茎段进行_________，然后再放入_________溶液中浸泡，最后用无菌水冲冼。若外植体不慎被细菌感染，采用划线分离法纯化细菌，在4个区域内划线需要将接种环灼烧灭菌_________次。

(2)植物组织培养的培养基可采用________灭菌。形成愈伤组织的过程中，除需无菌、营养和激素外，________等外界条件也很重要。

(3)2—3周后将生长健壮的丛壮苗在_______(A.LB培养基+适宜浓度BA B.LB培养基+适宜浓度NAA C.MS培养基+适宜浓度BA D.MS培养基+适宜浓度NAA)上继续生根，形成完整植株。定植前，还需逐渐__________进行炼苗。

【答案】

消毒 5%次氯酸钠 5 高压蒸汽灭菌法 光照、温度 D 降低湿度

【解析】

在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件：①消毒灭菌；②一定浓度的植物激素；③适宜的温度；④充足的养料。植物组织培养中植物激素使用：物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化。消毒和灭菌：外植体可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培养基需用高压蒸汽灭菌。

（1）在对黄花蒿外植体进行消毒时，先用70%的酒精进行处理，再用质量分数为5%次氯酸钠溶液浸泡，最后用无菌水冲冼。在平板划线法过程中，在每一次划线前后都需要对接种环进行灼烧灭菌，所以在4个区域内划线需要将接种环灼烧灭菌5次。

（2）植物组织培养的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。外植体脱分化形成愈伤组织的过程中，需要无菌、营养和激素等条件，此外光照、温度等外界条件也很重要。

（3）生长健壮的丛壮苗继续分化生根的过程，需要在MS培养基培养基中进行，并加入适宜浓度NAA。定植前，还需逐渐降低湿度进行炼苗。