生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题:
(1)培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用________法灭菌。检验大肠杆菌的含量时,通常将水样用_________进行一系列的梯度稀释。
(2)将稀释后的水样分别用玻璃刮刀_______到LB固体培养基,_______于恒温培养箱,在_______℃条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时_________(填需要或不需要)设置对照组。
(3)下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤,下列相关叙述正确的是_________。

A.步骤①倒平板操作时,倒好后应立即将其倒过来放置
B.步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线
C.步骤③多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落
D.步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数
【答案】高压蒸汽灭菌 无菌水 涂布 倒置 37 需要 C
【解析】稀释涂布法指的是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,在适宜条件下培养;在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落;稀释涂布平板法能够测定样品中活菌数。由图可知,①是倒平板,②是用接种环沾取菌液,③是进行平板划线,④是培养。
(1)微生物培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌;检验大肠杆菌的含量时,通常将水样用无菌水进行一系列的梯度稀释。
(2)将稀释后的水样分别用玻璃刮刀涂布到LB固体培养基,为了防止冷凝水污染培养基,因此需要将培养基 倒置于恒温培养箱,在37℃条件进行培养;用该方法统计样本菌落数时需要设置空白对照组。
(3)倒完平板后立即盖上培养皿,冷却后将平板倒过来放置,A错误;步骤②接种环火焰上灼烧后,待冷却后才可以沾取菌液后平板划线,B错误;步骤③多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落,C正确;步骤④培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行分离得到纯种,平板划线法不能对微生物进行计数,D错误。
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